Quantitative evaluation of experimental choroidal neovascularization by confocal scanning laser ophthalmoscopy: fluorescein angiogram parallels heparan sulfate proteoglycan expression

The objective of the present study was to develop a quantitative method to evaluate laser-induced choroidal neovascularization (CNV) in a rat model using Heidelberg Retina Angiograph 2 (HRA2) imaging. The expression of two heparan sulfate proteoglycans (HSPG) related to inflammation and angiogenesis was also investigated. CNV lesions were induced with argon laser in 21 heterozygous Zucker rats and after three weeks a fluorescein angiogram and autofluorescence exams were performed using HRA2. The area and greatest linear dimension were measured by two observers not aware of the protocol. Bland-Altman plots showed agreement between the observers, suggesting that the technique was reproducible. After fluorescein angiogram, HSPG (perlecan and syndecan-4) were analyzed by real-time RT-PCR and immunohistochemistry. There was a significant increase in the expression of perlecan and syndecan-4 (P < 0.0001) in retinas bearing CNV lesions compared to control retinas. The expression of these two HSPG increased with increasing CNV area. Immunohistochemistry demonstrated that the rat retina damaged with laser shots presented increased expression of perlecan and syndecan-4. Moreover, we observed that the overexpression occurred in the outer layer of the retina, which is related to choroidal damage. It was possible to develop a standardized quantitative method to evaluate CNV in a rat model using HRA2. In addition, we presented data indicating that the expression of HSPG parallels the area of CNV lesion. The understanding of these events offers opportunities for studies of new therapeutic interventions targeting these HSPG.

Estudo comparativo das dosagens de sódio, potássio, uréia, creatinina e ácido úrico no líquido amniótico entre 15-20 semanas e 38-42 semanas / A comparative study of human amniotic fluid concentration of sodium, potassium, urea, creatinini, and uric acid between 15-20 week and 38-42 week

O volume e a concentraçao do líquido amniótico dependem da integraçao entre o organismo materno e fetal e se modificam ao longo da gravidez. OBJETIVO. Analisar a concentraçao de sódio, potásio, uréia, cratinina e ácido úrico no líquido amnioótico no segundo e terceiro trimestre de gravidezes normais e verificar a influência da idade materna, raça, paridade e sexo dos conceptos nestes elementos. MÉTODOS. Cincoenta gestantes no segundo trimestre e 50 gestantes no termo da gravidez tiveram seus líquidos amnióticos submetidos a dosagem dos elementos acima descritos. O material foi obtido por amniocentese de indicaçao genética, no primeiro grupo, e em cesáreas eletivas, no segundo grupo. Foram utilizados os seguintes testes estatísticos: análise de variância a um critério; teste t de Student; teste do qui-quadrado; teste de Mann-Whitney na dependência da natureza das variáveis (a ( 0,05). RESULTADOS. Foi verificado que no terceiro trimestre ocorre diminuiçao significante na concentraçao de sódio, aumento significante na uréia, creatinina e ácido úrico, ao passo que o potássio nao apresenta alteraçoes. Por outro lado, nao houve interferência da idade materna, paridade, raça e sexo dos conceptos. Conclusao. Aanálise destes parâmetros no líquido amniótico pode servir como base para a avaliaçao do bem-estar fetal, principalmente em relaçao à funçao renal e na detecçao de algumas síndromes genéticas.

Desenvolvimento do radioimunoensaio para determinacao do estriol no fluido salivar. / Development of a radioimmunoassay for estriol determination in salivary fluid

O objetivo deste trabalho foi o de desenvolver um sistema de deteccao sensivel e especifico, necessitando assim, pequenas quantidades de saliva, e pouca ou nenhuma purificacao das amostras, alem de ser o ensaio rapido o suficiente para ser efetuado varias vezes num so dia, e realizavel na maioria dos laboratorios do nosso meio. Utilizaram-se 60 amostras de saliva de gestantes escolhidos ao acaso, em diferentes idades gestacionais colhidas 5 minutos apos estimulo com goma de mascar (Trident). Foram comparados 2 metodos: metodo com extracao e metodo direto. E apresentado um protocolo final de teste com analise dos parametros de sensibilidade, exatidao e precisao. O metodo desenvolvido apresenta caracteristicas que permite o seu uso para a determinacao do estriol no fluido salivar